紫外可見吸收光譜法是利用某些物質(zhì)的分子吸收10~800nm光譜區(qū)的輻射來進(jìn)行分析測定的方法,這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價(jià)電子和分子軌道上的電子在電子能級(jí)間的躍遷,廣泛用于有機(jī)和無機(jī)物質(zhì)的定性和定量測定。該方法具有靈敏度高、準(zhǔn)確度好、選擇性優(yōu)操作簡便、分析速度好、應(yīng)用廣泛等特點(diǎn)。其測定波長范圍為200-1000nm。
紫外可見吸收光譜法的原理:
物質(zhì)的分子的電子能級(jí)、振動(dòng)能級(jí)都是量子化的,只有當(dāng)輻射光子的能量恰好等于兩能級(jí)間的能量差(兩能級(jí)間的能量差與分子中價(jià)電子的結(jié)構(gòu)有關(guān))時(shí),分子才能吸收能量。
某一種分子的結(jié)構(gòu)是確定的,所以一種分子只能吸收波長在一定范圍內(nèi)光子。我們就可以通過測量分子對其所吸收的光子的波長范圍,來確定分子的結(jié)構(gòu)。
紫外可見吸收光譜法的應(yīng)用:
紫外可見分光光度法在有機(jī)物定性分析中有著廣泛的應(yīng)用,在無機(jī)物方面用于礦物、半導(dǎo)體、天然產(chǎn)物和化合物的研究。
紫外可見分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光譜特征,如吸收鋒數(shù)目、位置、形狀與標(biāo)準(zhǔn)光譜相比較,來確定某些基因的存在。
盡管紫外可見分光光度法是一種比較常用的方法,但是,在一些情況下它不能單獨(dú)用來確定一個(gè)未知化合物,還要與其它方法連用,才能實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確分析。