關(guān)鍵詞：雙路雙光束紫外可見分光光度計(jì)；苯酚；

美析儀器：UV-1700PC；

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

1、了解紫外可見分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)、性能及使用方法

2、熟悉定性、定量測(cè)定的方法

二、實(shí)驗(yàn)原理

紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry)，又稱紫外吸收光譜法( Ultraviolet Moleculor Absorption Spectrophtometry)，它是研究分子吸收190.0~1100.0nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)的吸收光譜。紫外吸收光譜主要產(chǎn)生于分子價(jià)電子在電子能級(jí)間的躍遷，是研究物質(zhì)電子光譜的分析方法。通過(guò)測(cè)定分子對(duì)紫外光的吸收，可以對(duì)大量的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物進(jìn)行定性和定量測(cè)定。

苯酚是一種劇毒物質(zhì)，可以致癌，已經(jīng)被列入有機(jī)污染物的黑名單。但在一些藥品、食品添加劑、消毒液等產(chǎn)品中均含有一定量的苯酚。如果其含量超標(biāo)，就會(huì)產(chǎn)生很大的毒害作用。苯酚在紫外光區(qū)的大吸收波長(zhǎng)λmax=270nm。對(duì)苯酚溶液進(jìn)行掃描時(shí)，在270nm處有較強(qiáng)的吸收峰。

定性分析時(shí)，可在相同的條件下，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品進(jìn)行波長(zhǎng)掃描，通過(guò)比較未知樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品的光譜圖對(duì)未知樣進(jìn)行鑒定。在沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)樣品的情況下，可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)譜圖或有關(guān)的電子光譜數(shù)據(jù)表進(jìn)行比較。

定量分析是在270nm處測(cè)定不同濃度苯酚的標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光值，并自動(dòng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再在相同的條件下測(cè)定未知樣品的吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可得出未知樣中苯酚的含量。

三、儀器與試劑

1．UV-1700PC型紫外可見分光光度計(jì)（美析儀器）

2．容量瓶（1000ml、250ml）

3．比色管（50ml）

4．吸量管（5ml、10ml）

5．苯酚（AR）

準(zhǔn)確稱取苯酚1.000g于200ml蒸餾水中，溶解后定量轉(zhuǎn)移到1000ml的容量瓶中，作為儲(chǔ)備液。

四、實(shí)驗(yàn)步驟

1．打開儀器及計(jì)算機(jī)、顯示器、打印機(jī)電源，進(jìn)入軟件操作系統(tǒng)，待儀器自檢結(jié)束，點(diǎn)擊OK，進(jìn)入操作主頁(yè)面。

2．波長(zhǎng)掃描

(1)確定波長(zhǎng)掃描參數(shù)：

光譜帶寬2.0nm

光度測(cè)量形式 吸光值

掃描范圍 200～500nm

掃描速度 1000nm/min

數(shù)據(jù)間隔點(diǎn) 1nm

存儲(chǔ)文件 選擇路徑和文件名

(2)做基線

將盛有參比液的比色皿分別放入?yún)⒈裙饴泛蜆悠饭饴罚_始進(jìn)行基線掃描

(3)波長(zhǎng)掃描

將盛有樣品和參比液的比色皿分別放入?yún)⒈裙饴泛蜆悠饭饴罚c(diǎn)擊開始掃描

(4)定性分析

將試樣的波長(zhǎng)掃描圖與已知樣的在相同條件下的波長(zhǎng)掃描圖或已知的譜圖相比較，對(duì)試樣進(jìn)行定性分析

3．定量分析

(1) 標(biāo)準(zhǔn)系列的配制

于5支50ml的比色管中，用吸量管分別加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，用蒸餾水定容至刻度，搖勻。

(2) 確定定量分析參數(shù)

設(shè)置a：方法 對(duì)每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的重復(fù)讀取次數(shù) 1

對(duì)每個(gè)樣品的重復(fù)讀取次數(shù) 1

是否需要測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)樣品 需要

校正曲線 線性

計(jì)算方式 用峰高計(jì)算定量的數(shù)值

b：樣品 總共測(cè)量樣品的個(gè)數(shù) 6

輸入待測(cè)樣品的名稱 苯酚

樣品標(biāo)簽從第幾號(hào)開始編輯 1

輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度值

在std欄中對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行標(biāo)識(shí)

c：質(zhì)量控制 需要質(zhì)量控制

對(duì)有問(wèn)題的測(cè)量結(jié)果標(biāo)記后繼續(xù)測(cè)量

輸入允許的大濃度

輸入允許的低濃度

d：儀器 狹縫 2.0nm

測(cè)定形式 吸光值

強(qiáng)度倍數(shù) 1

工作波長(zhǎng) 270nm

積分時(shí)間 5s

把空白液注入兩個(gè)比色皿內(nèi)，并分別放入?yún)⒈群蜆悠饭饴?，?ldquo;zero”進(jìn)行調(diào)零，然后按“OK”

e：報(bào)告 需要報(bào)告 要在線報(bào)告

f：結(jié)果儲(chǔ)存 輸入選擇的路徑與文件名

(3)開始定量測(cè)量，按照提示放入各樣品

(4)觀察標(biāo)準(zhǔn)、樣品及校正曲線

關(guān)鍵詞：雙路雙光束紫外可見分光光度計(jì)；苯酚；

美析儀器：UV-1700PC