1. A260/A280、A260/A230比值受溶液酸堿度及離子強(qiáng)度的影響,如酸溶液會(huì)使A260/A280比值降低,低離子強(qiáng)度和低 pH 溶液會(huì)增加 280 nm 處的光吸收值。因此必須確保空白檢測(cè)和溶解樣品所用Buffer的離子濃度和pH值一致。
2. 濃度接近2 ng/μl濃度的樣品可能會(huì)導(dǎo)致不可靠的260/280和/或260/230的比值。
3. 樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素,由于樣品中不可避免存在一些細(xì)小的顆粒,尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在會(huì)干擾測(cè)試效果。樣品的濃度不能過(guò)低,或者過(guò)高(超過(guò)光度計(jì)的測(cè)試范圍)。
4. 樣品混合要充分,否則吸光值太低,甚至出現(xiàn)負(fù)值;混合液不能存在氣泡,空白液無(wú)懸浮物,否則讀數(shù)漂移劇烈。樣品混合不均勻會(huì)直接導(dǎo)致檢測(cè)不確定,重復(fù)性低。
5. 樣品檢測(cè)上樣量不能太少,必須能夠保證能后連接上下兩根光纖形成光柱,從而使得檢測(cè)正常進(jìn)行。
6. 樣品臺(tái)清潔,在檢測(cè)前,檢測(cè)后以及連續(xù)使用儀器30分鐘后均需要對(duì)上下接觸樣品的部位用雙蒸水或純水擦拭。
7. 切忌不可用噴壺在樣品臺(tái)上噴射,以防液體液體進(jìn)入儀器內(nèi)部造成損壞。
8. 切忌不可用洗滌劑或異丙醇清潔基座。
9. 儀器放置位置應(yīng)當(dāng)遠(yuǎn)離通風(fēng)口,以免液滴蒸發(fā)太快導(dǎo)致濃度讀數(shù)偏大。